Los adenovirus oncol\u00edticos (AdOs) se multiplican y destruyen selectivamente c\u00e9lulas cancerosas. El modelo para evaluar su eficiencia ha sido un rat\u00f3n inmunosuprimido, ya que en c\u00e9lulas de rat\u00f3n se multiplican ineficientemente,\u00a0 por lo cual se usan c\u00e9lulas tumorales humanas donde s\u00ed son eficientes. Sin embargo, este modelo es inadecuado, no considera el efecto del sistema inmune. Los genes E6 y E7 del HPV-16 facilitan la multiplicaci\u00f3n del adenovirus en c\u00e9lulas murinas. Las c\u00e9lulas tumorales murinas TC-1<\/sup> poseen estos genes. Aqu\u00ed demostramos que los AdOs se multiplican en c\u00e9lulas TC-1<\/sup> y pueden ser usadas para evaluar AdOs en un modelo inmunocompetente.<\/p>\n Palabras clave:<\/strong> adenovirus oncol\u00edticos, c\u00e1ncer de pulm\u00f3n,TC-1<\/sup>, onc\u00f3lisis.<\/p>\n Abstract<\/strong><\/p>\n Oncolytic adenovirus (AdOs) multiplies and selectively kills cancer cells. An immunosuppressed mouse has been the model used to assess its efficiency, since they multiply inefficiently in mouse cells, human tumor cells are used where AdOs multiply efficiently. However, this model is inadequate, since it doesn\u2019t consider the immune system\u2019s effect. HPV-16 E6 E7 genes help in the multiplication of adenovirus in murine cells. TC-1<\/sup> Murine tumor cells possess these genes. Here we show that the AdOs multiply in TC-1<\/sup> cells and can be used to evaluate AdOs in an immunocompetent model.<\/p>\n Key words:<\/strong> oncolytic adenovirus, lung cancer,TC-1<\/sup>, oncolysis<\/p>\n Los adenovirus oncol\u00edticos (AdOs) son una modalidad de terapia g\u00e9nica contra el c\u00e1ncer, se caracterizan por multiplicarse y destruir selectivamente c\u00e9lulas cancerosas mediante onc\u00f3lisis viral. La evaluaci\u00f3n precl\u00ednica de los AdOs se ha limitado al uso de ratones inmunosuprimidos, porque este modelo permite implantar c\u00e9lulas tumorales humanas sin problemas de rechazo. La raz\u00f3n por la cual se utilizan ratones inmunosuprimidos es que los AdOs se replican de manera ineficiente en c\u00e9lulas tumorales de rat\u00f3n en comparaci\u00f3n con c\u00e9lulas tumorales humanas. A pesar de lo anterior, se han hecho importantes progresos en el desarrollo de virus oncol\u00edticos que pueden replicarse en c\u00e9lulas murinas (c\u00e9lulas de rat\u00f3n) (Eggerding y Pierce, 1986; Ginsberg et al. 1991; Silverstein y Strohl, 1986). Por ejemplo, un adenovirus murino oncol\u00edtico fue desarrollado con alto nivel de citotoxicidad en amplia variedad de c\u00e9lulas murinas\u00a0 tumorales (Robinson et al., 2009).<\/p>\n El problema con el uso de ratones inmunosuprimidos es que no representan un modelo adecuado para evaluar la eficacia terap\u00e9utica de los AdOs en ensayos precl\u00ednicos. Esto debido a que, en este modelo, no se toma en cuenta la participaci\u00f3n de la respuesta del sistema inmune en la distribuci\u00f3n del virus y los efectos colaterales. Por lo tanto, es urgente desarrollar un modelo inmunocompetente en el que los AdOs se puedan dividir e inducir onc\u00f3lisis, y de esta forma evaluar el impacto del sistema inmune en la eficiencia terap\u00e9utica de los AdOs y los efectos secundarios de esta terapia.<\/p>\n Los AdOs con deleciones del gen E1 podr\u00edan dividirse selectivamente en c\u00e9lulas tumorales que expresan los genes E7 del HPV-16. El marco abierto de lectura\u00a0(ORF) de E7 del HPV-16 codifica funciones para transactivaci\u00f3n transcripcional y transformaci\u00f3n celular que es an\u00e1loga a las de las prote\u00ednas E1 del adenovirus. La prote\u00edna E7 ha mostrado transactivar el promotor E2 del adenovirus y cooperar con la activaci\u00f3n del oncog\u00e9n ras para la transformaci\u00f3n de c\u00e9lulas de ri\u00f1\u00f3n de cachorro de rat\u00f3n\u00a0 primarias (Phelps et al., 1988). Se ha demostrado previamente que c\u00e9lulas que expresan E6 y E7 del HPV facilitan la replicaci\u00f3n de DNA de vectores adenovirales con deleci\u00f3n de E1A y E1B (Steinwaerder, Carlson y Lieber, 2000; 2001).<\/p>\n En el presente trabajo evaluamos la capacidad de un adenovirus oncol\u00edtico de multiplicarse en c\u00e9lulas murinas de c\u00e1ncer de pulm\u00f3n TC-1 que expresa los genes E6 y E7 del HPV-16.<\/p>\n Metodolog\u00eda<\/strong><\/p>\n L\u00edneas celulares<\/strong><\/p>\n Las c\u00e9lulas HeLa provienen de c\u00e1ncer cervical humano, fueron usadas como control positivo para la replicaci\u00f3n de los virus; las c\u00e9lulas TC-1 son c\u00e9lulas c\u00e1ncer de pulm\u00f3n de rat\u00f3n C57BL6 que poseen los genes E6 y E7 del HPV, y las c\u00e9lulas Lewis Lung Carcinoma (LLC-1), usadas como control negativo, provienen de c\u00e1ncer de pulm\u00f3n sin expresi\u00f3n de los genes E6 y E7 del HPV-16.\u00a0 Las c\u00e9lulas HeLa, TC-1 y HEK-293 se obtuvieron en\u00a0 ATCC (Rockville, MD). Las c\u00e9lulas HeLa y TC-1 fueron cultivadas en medio RPMI-1640 suplementado con suero bovino fetal inactivado (FBS) y penicilina\/estreptomicina (100 U\/ml); las l\u00edneas HEK-293 y LLC-1 con medio DMEM. Los medios de cultivo fueron obtenidos por VWR (Mediatech). Las c\u00e9lulas se incubaron en CO2<\/sub> 5% a 37\u00baC; el medio se cambi\u00f3 cada 2-3 d\u00edas.<\/p>\n Evaluaci\u00f3n de morfolog\u00eda celular<\/strong><\/p>\n Se sembraron 5X105<\/sup> c\u00e9lulas\/pozo en una caja de seis pozos las l\u00edneas HeLa, TC-1, LLC-1. Se incubaron en CO2<\/sub>, 5% a 37\u00baC por 24 h. Se infectaron con el Adhz60 con una multiplicidad de infecci\u00f3n (MOI) de 10 y se evaluaron los cambios en la morfolog\u00eda a las 0, 24, 48 y 72 h con el microscopio de luz (Olympus Microsystems, Redwood City, CA).<\/p>\n Tinci\u00f3n con cristal violeta<\/strong><\/p>\n Se sembraron 5\u00d7104<\/sup> c\u00e9lulas\/pozo en cajas de 24 pozos las l\u00edneas HeLa, TC-1 y LLC-1. Al d\u00eda siguiente se infectaron con los adenovirus Adwt, Adhz60, Adhz63 y AdLacZ con MOI de 1, 2.5, 5 y 10. Se incubaron en CO2<\/sub>, 5% a 37\u00baC. Despu\u00e9s de 72 h se retir\u00f3 el medio y c\u00e9lulas flotantes, las c\u00e9lulas adheridas se fijaron con 300 \u03bcL de formaldeh\u00eddo a 3.7% por tres minutos a temperatura ambiente. Se elimin\u00f3 el fijador usando vac\u00edo y se incub\u00f3 con 300 \u03bcL de cristal violeta a 1%. Se retir\u00f3 el cristal violeta usando vac\u00edo y se agregaron 500 \u03bcL de PBS (Mg+ y Ca+), se retir\u00f3 y dej\u00f3 secar. La caja se digitaliz\u00f3 usando el HP Scanjet 4070.<\/p>\n Ensayo de viabilidad celular con MTT<\/strong><\/p>\n Se sembraron 5\u00d7104<\/sup> c\u00e9lulas\/pozo en cajas de 12 pozos las l\u00edneas HeLa, TC-1 y LLC-1. Se incubaron con CO2<\/sub>, 5% por 24 h. Se infectaron con Adwt, Adhz60, Adhz63 y AdLacZ con un MOI de 1, 2.5, 5 y 10. Se incuba-ron con CO2<\/sub> 5% a 37\u00baC por 72 h. Se repiti\u00f3 el mismo procedimiento para c\u00e9lulas sin infectar. Se agregaron 100 \u03bcL de MTT en cada pozo a 37\u00baC y se incub\u00f3 por 4hrs. Se agregaron 50 \u03bcl de Buffer de lisis (10% SDS en 0.01N HCl) y se dej\u00f3 a 37\u02daC toda la noche. Se evalu\u00f3 la proliferaci\u00f3n celular midiendo la conversi\u00f3n de sales de tretazolio a formaz\u00e1n, de acuerdo a instrucciones del proveedor (Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN) como se report\u00f3 previamente (G\u00f3mez Guti\u00e9rrez et al., 2010). Se ley\u00f3 a 570 nm en el espectrofot\u00f3metro como porcentaje de c\u00e9lulas vivas.<\/p>\n Detecci\u00f3n de prote\u00edna e1a<\/strong><\/p>\n Se sembraron 5\u00d7105<\/sup> c\u00e9lulas\/pozo en cajas de seis pozos las l\u00edneas HeLa, TC-1 y LLC-1. Se incubaron en CO2<\/sub>, 5% por 24 h. Se infectaron con el Adhz60 a un MOI de 10. Se incubaron con CO2<\/sub>, 5% a 37\u00baC y se realizaron extractos de prote\u00ednas utilizando Buffer RIPA a las 0, 24, 48 y 72 h. Se cuantificaron las prote\u00ednas con el kit BCA Protein Assay (Pierce, Rockford, IL), se cargaron cantidades iguales de prote\u00ednas por carril en un SDS-PAGE a 10%, luego se trans\u00bfrieron a una membrana de PVDP (Amersham, Arlington Heights, IL). Se us\u00f3 anticuerpo de rat\u00f3n anti-E1A Adenovirus tipo 5 (BD Pharmingen, San Diego, CA), anticuerpo de conejo policlonal anti-a-actin humana (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Despu\u00e9s la membrana se incub\u00f3 con inmunoglobulina antirrat\u00f3n o anticonejo. Los reactivos de electroquimioluminiscencia se usaron de acuerdo al manual del proveedor (GE Healthcare Bio-Sciences, Pittsburgh, PA).<\/p>\n Inmunocitoqu\u00edmica para hex\u00f3n<\/strong><\/p>\n Se siguieron las instrucciones del manual del kit Ade-noX Rapid Titer Kit (Clontech, Mountain View, CA). Fueron sembradas 5\u00d7104<\/sup> c\u00e9lulas de las l\u00edneas celulares HeLa, TC-1 y LLC-1 en una caja de 24 pozos, al siguiente d\u00eda fueron infectadas con el Adhz60 y AdLacZ con un MOI de 10, se incubaron a 37\u00baC con CO2<\/sub>, 5% por 48 h. Cada pozo con c\u00e9lulas fue fijado con 0.5 ml de metanol 100% fr\u00edo por 10 min a -20\u00baC. Se retir\u00f3 el me-tanol y se lav\u00f3 tres veces con 0.5 ml de buffer de lavado (soluci\u00f3n salina amortiguada por fosfatos (PBS) con alb\u00famina de suero bovino (BSA) a 1%). Se agregaron 0.25 ml\u00a0 a cada pozo de anticuerpo antihex\u00f3n 1:1000 en buffer de lavado. Se incub\u00f3 1 h a 37\u00baC. Se aspir\u00f3 el anticuerpo y se lav\u00f3 tres veces con 0.5 ml de buffer de la-vado. Se agregaron 0.25 ml\u00a0 a cada pozo de anticuerpo antirrat\u00f3n de conejo conjugado a peroxidasa de r\u00e1bano (HRP) diluido 1:500 en buffer de lavado. Se incub\u00f3 1 h a 37\u00baC. Se aspir\u00f3 el anticuerpo secundario y se lav\u00f3 tres veces con 0.5 ml de buffer de lavado. Se agregaron 0.25 ml de diaminobencidina (DAB) e incub\u00f3 10 min a temperatura ambiente. Se aspir\u00f3 el DAB y se agregaron 0.5 ml de PBS en cada pozo.<\/p>\n El ADHZ60 induce efecto citop\u00e1tico similar en c\u00e9lulas HeLa Y TC-1<\/strong><\/p>\n El Adhz60 indujo a las 72 h efecto citop\u00e1tico (CPE) evidente en c\u00e9lulas TC-1 (que poseen los genes E6 y E7 del HPV-16) y las c\u00e9lulas HeLa. Las c\u00e9lulas pierden la adherencia a la superficie, adquieren una forma m\u00e1s redonda, llegando a fusionarse con otras c\u00e9lulas. Las c\u00e9lulas LLC-1 presentan un CPE muy disminuido. En las l\u00edneas celulares HeLa y TC-1, la cantidad de c\u00e9lulas a lo largo del tiempo se observ\u00f3 disminuida mientras que en la l\u00ednea celular\u00a0 LLC-1 no se observ\u00f3 disminuci\u00f3n importante (figura 2).<\/p>\n Las c\u00e9lulas TC-1 son lisadas por los ADHZ60, ADHZ63 y ADHZWT<\/strong><\/p>\n La l\u00ednea celular HeLa fue la m\u00e1s lisada por Adhz60, Adhz63 y Adwt, efecto no presentado con AdLacZ. En\u00a0la l\u00ednea LLC-1 se observ\u00f3 en general muy poca lisis incluso a MOI de 10 para todos los adenovirus. La l\u00ednea TC-1 s\u00ed mostr\u00f3 un grado importante de lisis a un MOI de 10 para los adenovirus Adhz60, Adhz63 y Adwt (figura 3).<\/p>\n El adenovirus con deleci\u00f3n total o parcial para e1b disminuyen la viabilidad de las c\u00e9lulas TC-1<\/strong><\/p>\n Los efectos observados a 10 MOI fueron los siguientes: el adenovirus Adwt disminuy\u00f3 significativamente la sobrevivencia en c\u00e9lulas HeLa (4.25%), las c\u00e9lulas TC-1 fueron afectadas de forma importante (20%) mientras que las LLC-1 no disminuyeron en forma significativa su sobrevivencia (52%). El Adhz60 disminuy\u00f3 la viabilidad de las c\u00e9lulas TC-1 a 28.56%, en las c\u00e9lulas HeLA 19.34% y las LLC-1 a 80%. El adenovirus Adhz63 disminuy\u00f3 la viabilidad de las c\u00e9lulas TC-1 a 35%, en las c\u00e9lulas HeLA 31% y las LLC-1 a 68%. El AdLacZ no afect\u00f3 la sobrevida en ninguna l\u00ednea celular (figura 4).<\/p>\n Las c\u00e9lulas TC-1 infectadas por ADHZ60 producen la prote\u00edna temprana E1A\u00a0<\/strong><\/p>\n La prote\u00edna adenoviral E1A fue expresada altamente en la l\u00ednea celular HeLa. Las c\u00e9lulas LLC-1 expresaron escasamente la prote\u00edna E1A, mientras que la l\u00ednea TC-1 present\u00f3 buena expresi\u00f3n de la prote\u00edna (figura 5).<\/p>\n Las c\u00e9lulas TC-1 infectadas por ADHZ60 producen la prote\u00edna tard\u00eda hex\u00f3n<\/strong><\/p>\n La l\u00ednea celular HeLa infectada con Adhz60 mostr\u00f3 positividad para todas las c\u00e9lulas, la l\u00ednea LCC-1 mostr\u00f3 muy poca positividad mientras que en la l\u00ednea TC-1 se observ\u00f3 mayor positividad que en la l\u00ednea LLC-1. Las tres l\u00edneas infectadas con el AdLacZ no mostraron positividad para la prote\u00edna (figura 6).<\/p>\n <\/p>\n La l\u00ednea celular TC-1 favorece la producci\u00f3n de part\u00edculas virales infectivas<\/strong><\/p>\n La l\u00ednea celular HeLa produjo 1×109<\/sup> ifu\/ml, TC-1 1×105 ifu\/ml y la l\u00ednea LLC-1 1×102<\/sup> ifu\/ml (figura 7).<\/p>\n Discusi\u00f3n<\/strong><\/p>\n Se ha reportado que c\u00e9lulas tumorales que expresan E6 o E7 del HPV favorecen la multiplicaci\u00f3n del DNA de adenovirus con deleci\u00f3n de E1A y E1B (Steinwaerder, Carlson y Lieber, 2000; 2001). Adem\u00e1s, el marco abierto de lectura (ORF) de E7 del HPV codi\u00bfca funciones de transactivaci\u00f3n transcripcional y transformaci\u00f3n celular an\u00e1logas a las de las prote\u00ednas E1 adenovirales.<\/p>\n El prop\u00f3sito de este estudio fue determinar si las c\u00e9lulas de rat\u00f3n con c\u00e1ncer de pulm\u00f3n TC-1 podr\u00edan favorecer la multiplicaci\u00f3n de\u00a0 AdOs con deleci\u00f3n parcial o completa del gen E1B. Encontramos que el Adhz60 (que posee deleci\u00f3n de E1B\/55K) fue capaz de inducir niveles similares de CPE e inhibici\u00f3n de la viabilidad celular en c\u00e9lulas HeLA y TC-1 en un MOI de 10 (20 y 28% de viabilidad celular respectivamente) (figuras 5-7).<\/p>\n Previamente, un vector del virus vaccina que expresa interfer\u00f3n beta (IFN\u03b2) fue evaluado en c\u00e9lulas TC-1. El estudio encontr\u00f3 que a infecci\u00f3n con el virus a 1 MOI result\u00f3 en \uf07e 40% de c\u00e9lulas viables. La eficiencia de la destrucci\u00f3n de las c\u00e9lulas tumorales pudo ser causado por dos mecanismos simult\u00e1neos: la multiplicaci\u00f3n y expresi\u00f3n de IFN\u03b2. Por lo tanto, es dif\u00edcil de-terminar el rol de la multiplicaci\u00f3n de los AdOs en estas condiciones experimentales (Wang et al., 2012). Sin embargo, otros estudios reportaron que un adenovirus que posee E1A mostr\u00f3 ligeramente mayor citotoxicidad cuando infectaba c\u00e9lulas TC-1 a un MOI de 100 que un adenovirus que expresa prote\u00ednas de choque de calor sgp96 o mgp96 (Di Paolo et al., 2006). Estos resultados contrastantes hacen dif\u00edcil determinar la eficacia real de la multiplicaci\u00f3n de AdOs en c\u00e9lulas TC-1. En nuestro estudio,\u00a0 Adhz60 (que posee deleci\u00f3n de E1B\/55K) a un MOI de 10 indujo niveles similares de CPE y citotoxicidad en c\u00e9lulas HeLa y TC-1. Y a diferencia de los dos estudios previos mencionados arriba, nuestra construcci\u00f3n no expresa un gen terap\u00e9utico.<\/p>\n En otro estudio, nueve l\u00edneas tumorales murinas fueron examinadas para la captura del adenovirus (Ad5), expresi\u00f3n g\u00e9nica, multiplicaci\u00f3n y efectos citop\u00e1ticos. En siete de estas l\u00edneas celulares murinas, la infectividad y CPE producidos fueron similares a los mostrados en las l\u00edneas tumorales humanas (Hallden et al., 2003). Sin embargo, la aplicaci\u00f3n del Ad5 en ensayos cl\u00ednicos podr\u00eda ser considerada controversial debido a que Ad5 tambi\u00e9n puede multiplicarse en c\u00e9lulas normales.<\/p>\n Algunas publicaciones han reportado resultados contradictorios en cuanto a la capacidad de los AdOs para multiplicarse en c\u00e9lulas murinas. Por ejemplo, en-sayos in vitro de s\u00edntesis de DNA viral en fibroblastos de rata y rat\u00f3n revelaron expresi\u00f3n de hex\u00f3n, pero no de \u00bfbra (Eggerding y Pierce, 1986; Silverstein y Strohl, 1986). En contraste, la expresi\u00f3n de hex\u00f3n y \u00bfbra fue-ron detectadas en algunos tumores de c\u00e9lulas murinas (Hallden et al., 2003). Estos reportes y nuestro estudio indican que la capacidad de los AdOs para multiplicarse en c\u00e9lulas murinas podr\u00eda ser especifica de tejido.<\/p>\n Conclusiones<\/strong><\/p>\n La l\u00ednea celular murina TC-1 es semipermisiva para la multiplicaci\u00f3n del adenovirus oncol\u00edtico. Esta l\u00ednea puede ser usada en un modelo murino inmunocompetente para evaluar adenovirus oncol\u00edticos.<\/p>\n <\/p>\n *Universidad Aut\u00f3noma de Nuevo Le\u00f3n.<\/p>\n **Universidad de Louisville.<\/p>\n Contacto:elvismtzj@gmail.com<\/p>\n <\/p>\n Referencias<\/strong><\/p>\n Di Paolo, N.C., et al. (2006). Effect of adenovirus-mediated heat shock protein expression and oncolysis in combination with low-dose cyclophosphamide treatment on antitumor immune responses. Cancer research, 66, 960-969.<\/p>\n Eggerding, F.A., y Pierce, W.C. (1986). Molecular biology of adenovirus type 2 semipermissive infections. I. Viral growth and expression of viral replicative functions during restricted adenovirus infection. Virology, 148, 97-113.<\/p>\n Ginsberg, H.S., et al. (1991). A mouse model for investigating the molecular pathogenesis of adenovirus pneumonia. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 88, 1651-1655.<\/p>\n G\u00f3mez Guti\u00e9rrez, J.G., et al. (2010). Developing adenoviral vectors encoding therapeutic genes toxic to host cells: comparing binary and single-inducible vectors expressing truncated E2F-1. Virology, 397, 337-345.<\/p>\n Hallden, G., et al. (2003). 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G\u00f3mez Guti\u00e9rrez**, Mar\u00eda de Jes\u00fas Loera*, Odila Saucedo C\u00e1rdenas*, Roberto Montes de Oca Luna* CIENCIA UANL \/ A\u00d1O 20, No. 83, ENERO-MARZO 2017 Resumen Los adenovirus oncol\u00edticos (AdOs) se multiplican y destruyen selectivamente c\u00e9lulas cancerosas. El modelo para evaluar su eficiencia ha sido un rat\u00f3n inmunosuprimido, ya que en c\u00e9lulas de rat\u00f3n se multiplican ineficientemente,\u00a0 […]<\/p>\n","protected":false},"author":2,"featured_media":6935,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_monsterinsights_skip_tracking":false,"_monsterinsights_sitenote_active":false,"_monsterinsights_sitenote_note":"","_monsterinsights_sitenote_category":0,"footnotes":""},"categories":[27],"tags":[],"class_list":["post-6934","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-investigacion"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/posts\/6934","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/users\/2"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fcomments&post=6934"}],"version-history":[{"count":2,"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/posts\/6934\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":6943,"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/posts\/6934\/revisions\/6943"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/media\/6935"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fmedia&parent=6934"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fcategories&post=6934"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Ftags&post=6934"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}![\"\"](\"http:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/wp-content\/uploads\/2017\/10\/fig_1_composicion_adenovirus.png\")
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