![\"VPH_vacuna\"](\"http:\/\/cienciauanl.uanl.mx\/wp-content\/uploads\/2016\/08\/VPH_vacuna.jpg\")
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JOS\u00c9 JUAN P\u00c9REZ TRUJILLO* , GABRIEL FIGUEROA PARRA* , RODOLFO GARZA MORALES* , HUMBERTO RODR\u00cdGUEZ ROCHA* , ARACELY GARC\u00cdA GARC\u00cdA* , ODILA SAUCEDO C\u00c1RDENAS*,**, ROBERTO MONTES DE OCA LUNA* , MAR\u00cdA DE JES\u00daS LOERA ARIAS**<\/p>\n
CIENCIA UANL \/ A\u00d1O 19, No. 80, JULIO-AGOSTO 2016<\/p>\n
El c\u00e1ncer de c\u00e9rvix es una neoplasia maligna que se encuentra relacionada con la presencia del virus del papiloma humano (VPH). De acuerdo con la Organizaci\u00f3n Mundial de la Salud, se estima que cada a\u00f1o aparecen cerca de 530,000 nuevos casos y 270,000 muertes en el mundo, y que alrededor de 85% de estos casos se presenta en pa\u00edses subdesarrollados. (1)<\/p>\n
La distribuci\u00f3n mundial de los tipos de VPH es alta y variable, pero se ha reportado una mayor prevalencia de los tipos 16, 18, 31, 52 y 58, (2) los cuales han sido reportados como virus de alto riesgo oncog\u00e9nico. (3) Las reinfecciones persistentes por VPH predisponen al desarrollo de c\u00e1ncer, el cual inicia por la integraci\u00f3n del genoma viral en la c\u00e9lula y la expresi\u00f3n de las prote\u00ednas virales oncog\u00e9nicas, E6 y E7, que provocan la inactivaci\u00f3n de los genes supresores de tumor p53 y pRB, respectivamente, iniciando as\u00ed con la malignizaci\u00f3n celular. (4)<\/p>\n
Los tratamientos contra el c\u00e1ncer consisten en la reducci\u00f3n y eliminaci\u00f3n de las c\u00e9lulas tumorales por quimioterapia y radioterapia o la remoci\u00f3n del tumor por cirug\u00eda; sin embargo, no suelen ser del todo efectivas y se presentan casos de reincidencia y met\u00e1stasis. (5)<\/p>\n
En los \u00faltimos a\u00f1os se han desarrollado vacunas profil\u00e1cticas para prevenir la infecci\u00f3n por VPH, las cuales consisten en la generaci\u00f3n de anticuerpos neutralizantes contra las prote\u00ednas estructurales L1\/L2 del virus, \u00e9stas impiden la entrada viral en la c\u00e9lula y su diseminaci\u00f3n; dichas vacunas ya son comercializadas y aplicadas en la poblaci\u00f3n generando altos niveles de protecci\u00f3n. (6)<\/p>\n
En cuanto al desarrollo de tratamientos terap\u00e9uticos, las oncoprote\u00ednas E6 y E7 han sido tema de numerosas investigaciones debido a su rol en el desarrollo del c\u00e1ncer, as\u00ed como los ep\u00edtopos que presentan; sin embargo, a\u00fan se presentan barreras para obtener una vacuna terap\u00e9utica eficiente. (7)<\/p>\n
La mayor\u00eda de las estrategias se han enfocado en despertar una respuesta inmune celular, ya que es la m\u00e1s efectiva para la eliminaci\u00f3n de c\u00e9lulas malignizadas. En esta revisi\u00f3n recopilamos los trabajos m\u00e1s relevantes de los \u00faltimos a\u00f1os enfocados a despertar una respuesta inmune celular mediante la estrategia del direccionamiento de ant\u00edgenos al ret\u00edculo endopl\u00e1smico.<\/p>\n
EL RET\u00cdCULO ENDOPL\u00c1SMICO <\/strong><\/p>\n El ret\u00edculo endopl\u00e1smico (RE) recibe de manera cotraduccional y postraduccional todas las prote\u00ednas destinadas a la v\u00eda secretora, a los lisosomas o a la incorporaci\u00f3n a la membrana plasm\u00e1tica; esto gracias a una secuencia de aproximadamente 20 amino\u00e1cidos llamada p\u00e9ptido se\u00f1al (SP, por sus siglas en ingl\u00e9s), presente en el extremo N-terminal. Una vez en ret\u00edculo endopl\u00e1smico, las prote\u00ednas reci\u00e9n sintetizadas sufren modificaciones postraduccionales, plegamiento y ensamblaje por acci\u00f3n de prote\u00ednas con propiedades de chaperonas, isomerasas, peptidasas, oxidoreductasas, entre otras, para posteriormente ser empaquetadas en ves\u00edculas y enviadas al aparato de Golgi.<\/p>\n En el caso de las prote\u00ednas que no logran ser plegadas de manera adecuada, o cuando se presenta un exceso de prote\u00ednas a procesar en ret\u00edculo endopl\u00e1smico, se genera una respuesta aguda de estr\u00e9s en este org\u00e1nulo (tambi\u00e9n conocida como respuesta a prote\u00ednas mal plegadas oUPR, por sus siglas en ingl\u00e9s) que consiste en la activaci\u00f3n de genes involucrados en el procesamiento de las prote\u00ednas,\u00a0con el fin de eliminar la sobrecarga, por medio de la v\u00eda de degradaci\u00f3n asociada a ret\u00edculo endopl\u00e1smico (ERAD, por sus siglas ingl\u00e9s), la cual culmina con la ubiquitinizaci\u00f3n y degradaci\u00f3n de dichas prote\u00ednas en el proteosoma; (8,9) sin embargo, cuando el estr\u00e9s es cr\u00f3nico se activa el proceso de muerte celular programada o apoptosis. (10)<\/p>\n PRESENTACI\u00d3N DE ANT\u00cdGENOS <\/strong><\/p>\n En condiciones fisiol\u00f3gicas normales, las c\u00e9lulas del sistema inmune participan en un proceso de inmunovigilancia para detectar infecciones o alteraciones en las c\u00e9lulas y \u00e9stos se realiza a trav\u00e9s del reconocimiento del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC, por sus siglas en ingl\u00e9s) tipo I y II. El MHC-I se expresa en todas las c\u00e9lulas nucleadas y presenta ep\u00edtopos de prote\u00ednas intracelulares; mientras que el MHC-II se expresa en las c\u00e9lulas presentadoras de ant\u00edgenos (APC, por sus siglas en ingl\u00e9s), como macr\u00f3fagos y c\u00e9lulas dendr\u00edticas, y presenta ep\u00edtopos de prote\u00ednas ex\u00f3genas; sin embargo, estas c\u00e9lulas tambi\u00e9n pueden presentar dichos ep\u00edtopos por MHC-I mediante el proceso llamado presentaci\u00f3n cruzada de ant\u00edgeno. (11)<\/p>\n La formaci\u00f3n del MHC-I se lleva a cabo en el ret\u00edculo endopl\u00e1smico donde se integra con una cadena pesada anclada a la membrana, una cadena corta soluble de \u03b22- microglobulina y un ep\u00edtopo de 8 a 10 amino\u00e1cidos cargado en la hendidura de la porci\u00f3n distal de la cadena pesada para ser presentado al receptor TCR (T-cell receptor) de los linfocitos. Este complejo presenta principalmente ep\u00edtopos provenientes de prote\u00ednas intracelulares degradadas por el proteosoma (incluyendo aquellas derivadas de la v\u00eda ERAD), los cuales pueden ser productos de prote\u00ednas propias, derivadas del mecanismo de eliminaci\u00f3n de prote\u00ednas no funcionales, y de prote\u00ednas no propias, como ant\u00edgenos de virus o bacterias. (12)<\/p>\n Tambi\u00e9n se han descrito otras fuentes de p\u00e9ptidos para presentaci\u00f3n por MHC-I como la transferencia de p\u00e9ptidos por uniones tipo gap entre c\u00e9lulas vecinas, la generaci\u00f3n de p\u00e9ptidos a trav\u00e9s de los productos defectuosos ribosomales (DRiPs, por sus siglas en ingl\u00e9s) y los p\u00e9ptidos ligados generados por el splicing alternativo en el core 20S del proteosoma. (13)<\/p>\n Los p\u00e9ptidos generados en el citosol deben ingresar al ret\u00edculo endopl\u00e1smico y esto se logra a trav\u00e9s de prote\u00ednas de transporte asociado a presentaci\u00f3n de ant\u00edgeno (TAP, por sus siglas en ingl\u00e9s). Sin embargo, la eficiencia con que esto ocurre es baja, ya que se ha reportado que por cada 104 prote\u00ednas degradadas s\u00f3lo se presenta 1 ep\u00edtopo por MHC-I en la membrana celular. (14) Una vez que dichos p\u00e9ptidos logran entrar al ret\u00edculo endopl\u00e1smico, \u00e9stos son editados a trav\u00e9s de una serie de cortes en su extremo N-terminal por acci\u00f3n de las aminopeptidasas asociadas a presentaci\u00f3n de ant\u00edgenos (ERAAP, por sus siglas en ingl\u00e9s), formando as\u00ed los ep\u00edtopos que ser\u00e1n presentados por el MHC-I. (15,16)<\/p>\n Adem\u00e1s, se sabe que las c\u00e9lulas tumorales o infectadas por virus han generado mecanismos de evasi\u00f3n al sistema inmune, siendo el m\u00e1s destacado la disminuci\u00f3n de la expresi\u00f3n de mol\u00e9culas de MHC-I para impedir la presentaci\u00f3n de ant\u00edgenos. (17) Por lo anterior, desde hace a\u00f1os se ha trabajado en estrategias que ayuden a direccionar de manera m\u00e1s eficaz los ant\u00edgenos a las v\u00edas de presentaci\u00f3n por MHC y de esta manera lograr una mejor activaci\u00f3n de la respuesta inmune. (18)<\/p>\n ENV\u00cdO DE ANT\u00cdGENOS AL RET\u00cdCULO ENDOPL\u00c1SMICO A TRAV\u00c9S DE CHAPERONA<\/strong>S<\/p>\n Se ha descrito que la inmunizaci\u00f3n con chaperonas del ret\u00edculo endopl\u00e1smico obtenidas a partir de lisados de c\u00e9lulas tumorales o infectadas por virus es capaz de despertar una respuesta inmune mediada por linfocitos T CD8+, y que dicho efecto se atribuye a que durante la expresi\u00f3n de prote\u00ednas en la c\u00e9lula afectada, hay un gran porcentaje de ant\u00edgenos espec\u00edficos del tumor o virus,\u00a0que se encuentran formando complejos con las chaperonas. (19) Estos complejos son procesados por las v\u00edas previamente descritas as\u00ed como por la v\u00eda de presentaci\u00f3n cruzada de ant\u00edgeno, la cual amplifica la respuesta inmune obtenida al compararla con utilizar el ant\u00edgeno solo. (20) Debido a estas observaciones, se ha optado por realizar fusiones g\u00e9nicas de ant\u00edgenos con diversas chaperonas mediante el uso de la ingenier\u00eda gen\u00e9tica.<\/p>\n La calreticulina es una prote\u00edna chaperona de 63 kDa residente en el lumen del ret\u00edculo endopl\u00e1smico, por lo cual presenta un p\u00e9ptido se\u00f1al y una se\u00f1al KDEL, para su retenci\u00f3n en este org\u00e1nulo, adem\u00e1s de sitios de uni\u00f3n a Ca+2<\/sup>. (21) \u00c9sta es una de las prote\u00ednas que participan en el complejo de carga de ant\u00edgeno (PLC, por sus siglas en ingl\u00e9s), compuesto adem\u00e1s por las prote\u00ednas de transporte asociado a presentaci\u00f3n de ant\u00edgeno (TAP), la tapasina, ERp57 y calnexina. (22) Adem\u00e1s, la calreticulina tambi\u00e9n presenta funciones como regulador de los niveles citos\u00f3licos de Ca+2, y como se\u00f1al de fagocitosis para c\u00e9lulas preapopt\u00f3ticas, entre otras funciones. (23)<\/p>\n En un estudio in vitro se determin\u00f3 que la deficiencia de calreticulina provoca una disminuci\u00f3n del MHCI, ya que participa estabiliz\u00e1ndolo para su migraci\u00f3n a la membrana celular. (24) Asimismo, se ha reportado que participa en la recaptura y reciclaje de dicho complejo desde el aparato de Golgi y favorece el cargado correcto de los ep\u00edtopos. (25)<\/p>\n Otra caracter\u00edstica importante de la calreticulina es su rol en la membrana celular como se\u00f1al para estimular la fagocitosis de c\u00e9lulas apopt\u00f3ticas por fagocitos profesionales y no profesionales. Este proceso ha sido catalogado como muerte inmunog\u00e9nica. (26,27) Sin embargo, se ha demostrado que esta se\u00f1al se encuentra bloqueada por la expresi\u00f3n de CD47, por lo que algunos tratamientos que interfieren con CD47 han demostrado mejorar la respuesta inmune. (28)<\/p>\n Se ha reportado que al fusionar el ant\u00edgeno E7 del VPH16 a calreticulina, e inmunizar ratones con dichas construcciones se obtiene un aumento de la respuesta inmune espec\u00edfica al ant\u00edgeno. (29,30) Asimismo, en un estudio comparativo con vacunas de ADN donde se fusion\u00f3 el ant\u00edgeno E7 del VPH16 a se\u00f1ales de env\u00edo a lisosomas o a calreticulina, HSP70 o la exotoxina A de P. aeuruginosa para su direccionamiento al ret\u00edculo endopl\u00e1smico, se observ\u00f3 que con el env\u00edo dirigido hacia el RE, y en particular mediante la fusi\u00f3n a calreticulina, se obtiene una mayor respuesta inmune antitumoral espec\u00edfica. (31) Posteriormente se demostr\u00f3 que este sistema era reproducible para la prote\u00edna E6 del VPH16, donde adem\u00e1s se utiliz\u00f3 la se\u00f1al VP22 del virus del herpes simple tipo I para la diseminaci\u00f3n intercelular del ant\u00edgeno, con lo cual se podr\u00eda aumentar el n\u00famero de c\u00e9lulas que presenten el ant\u00edgeno. Con esta estrategia se obtuvo una buena protecci\u00f3n; sin embargo, la fusi\u00f3n a calreticulina prevaleci\u00f3 como la mejor estrategia para la obtenci\u00f3n de un mayor n\u00famero de linfocitos CD8+ espec\u00edficos, as\u00ed como una mejor respuesta antitumoral. (32) A pesar de esto, se ha reportado que estas vacunas antitumorales no eran eficaces en estadios avanzados de la enfermedad, por lo que se ha optado por combinarlas con terapias adyuvantes, (33,34) as\u00ed como continuar con la b\u00fasqueda para mejorar los resultados. Desde entonces, se han realizado numerosos estudios de evaluaci\u00f3n de la respuesta inmune empleando la calreticulina fusionada a diversos ant\u00edgenos, que han resultado en un aumento de linfocitos CD8+ espec\u00edficos, as\u00ed como en una mayor sobrevivencia en los ensayos antitumorales in vivo tanto en modelos profil\u00e1cticos como terap\u00e9uticos de la enfermedad. (29,30,35-38) Donde adem\u00e1s se ha buscado no s\u00f3lo mejorar la presentaci\u00f3n de ant\u00edgenos, sino tambi\u00e9n la sobrevida y funcionalidad de las c\u00e9lulas presentadoras de ant\u00edgeno con el objetivo de optimizar dicho mecanismo. (39)<\/p>\n Hay que mencionar que hay m\u00faltiples fusiones de los ant\u00edgenos del VPH a otras chaperonas residentes del ret\u00edculo endopl\u00e1smico, como a gp96, la cual fue capaz de\u00a0generar una respuesta celular tipo Th1 reduciendo as\u00ed el crecimiento tumoral; (34) lo mismo se report\u00f3 con la fusi\u00f3n de un ep\u00edtopo de E7 a las chaperonas ER-60, tapasina y calnexina. (40) Sin embargo, la fusi\u00f3n a calreticulina es una estrategia que ha avanzado en diversos ensayos precl\u00ednicos y cl\u00ednicos. (41)<\/p>\n Por otro lado, en estudios recientes se ha reportado que la sobreexpresi\u00f3n de calreticulina en algunos tipos de c\u00e1ncer est\u00e1 relacionada con la capacidad de invasi\u00f3n celular y met\u00e1stasis; esto posiblemente se deba a la participaci\u00f3n de la calreticulina en la homeostasis de Ca+2<\/sup> intracelular as\u00ed como en m\u00faltiples v\u00edas de se\u00f1alizaci\u00f3n involucradas en la adhesi\u00f3n y motilidad celular. (42) Esto representa una posible desventaja en el uso de las estrategias que involucren la sobreexpresi\u00f3n de prote\u00ednas propias de la c\u00e9lula, ya que esto podr\u00eda afectar el equilibrio intracelular; aun as\u00ed, deben realizarse m\u00e1s estudios para determinar si la sobreexpresi\u00f3n transitoria de la calreticulina que ocurre durante la inmunizaci\u00f3n representa un verdadero riesgo.<\/p>\n DIRECCIONAMIENTO DE ANT\u00cdGENOS UTILIZANDO UN P\u00c9PTIDO SE\u00d1AL<\/strong><\/p>\n Como ya mencionamos anteriormente, el p\u00e9ptido se\u00f1al consiste en una peque\u00f1a secuencia de amino\u00e1cidos presente en el extremo N-terminal de todas las prote\u00ednas destinadas a la v\u00eda secretora, y \u00e9ste es escindido durante la maduraci\u00f3n de la prote\u00edna. Su principal funci\u00f3n es enmarcar el env\u00edo de las prote\u00ednas reci\u00e9n sintetizadas a su org\u00e1nulo correspondiente; adem\u00e1s, se ha reportado que en algunos casos esta se\u00f1al puede estar involucrada en la regulaci\u00f3n de los niveles de transcripci\u00f3n del gen asociado. (43)<\/p>\n Se ha demostrado que ep\u00edtopos cortos de 9-11 amino\u00e1cidos expresados por minigenes fusionados a un p\u00e9ptido se\u00f1al pueden entrar directamente al ret\u00edculo endopl\u00e1smico y derivar en un aumento en la presentaci\u00f3n de estos ep\u00edtopos por el MHC-I. (44,45) Esto representa una buena estrategia para mejorar la presentaci\u00f3n de ant\u00edgenos ya que aumenta la presencia del ep\u00edtopo espec\u00edfico en el ret\u00edculo endopl\u00e1smico, y gracias a su tama\u00f1o podr\u00eda pasar directamente a ser cargado al MHC-I; sin embargo, es necesario mencionar que existen limitantes debido a los distintos haplotipos de MHC de la poblaci\u00f3n. Por lo anterior, se siguen buscando estrategias que involucren el uso de prote\u00ednas completas o t\u00e1ndems de ep\u00edtopos, que al ser degradados nos puedan otorgar los ep\u00edtopos m\u00e1s inmunog\u00e9nicos para cada individuo.<\/p>\n FUSI\u00d3N DE ANT\u00cdGENOS A UNA SE\u00d1AL KDEL<\/strong><\/p>\n Debido a la din\u00e1mica que presenta el ret\u00edculo endopl\u00e1smico, pueden presentarse p\u00e9rdidas de prote\u00ednas residentes de este org\u00e1nulo hacia el cis-Golgi o, eventualmente, al espacio extracelular; por lo tanto, es necesaria la presencia de se\u00f1ales espec\u00edficas que permitan su recaptura hacia el ret\u00edculo endopl\u00e1smico. (46) Para esto existen principalmente dos se\u00f1ales, KDEL (para prote\u00ednas solubles) y KKXX (para prote\u00ednas transmembranales), la primera muestra valores de mayor eficiencia en la recaptura de prote\u00ednas desde compartimentos post-RE. (47)<\/p>\n La se\u00f1al KDEL (Lys-Asp-Glu-Leu) se encuentra en el extremo C-terminal de las prote\u00ednas residentes en el lumen del ret\u00edculo endopl\u00e1smico. Esta se\u00f1al interacciona con el receptor KDEL presente en membranas de ves\u00edculas posRE, donde su afinidad aumenta en las condiciones ligeramente \u00e1cidas de las ves\u00edculas de la v\u00eda secretora, pero decrece en el pH neutro del ret\u00edculo endopl\u00e1smico. (48)<\/p>\n En un estudio se demostr\u00f3 que el ant\u00edgeno E7 fusionado a KDEL pod\u00eda ser usado como una estrategia para direccionamiento intracelular y mejorar as\u00ed la presentaci\u00f3n de ant\u00edgenos por c\u00e9lulas dendr\u00edticas cultivadas in vitro, las cuales al ser utilizadas in vivo demostraron que son capaces de generar una regresi\u00f3n tumoral y un aumento en la sobrevida de los ratones tratados; (49) induciendo la producci\u00f3n de TNF-\u03b1 IFN-\u03b3. (50) Esto nos sugiere que no solamente la fusi\u00f3n de los ant\u00edgenos a prote\u00ednas residentes del ret\u00edculo endopl\u00e1smico promueve una mejora en la respuesta inmune espec\u00edfica, sino tambi\u00e9n el aumentar la estad\u00eda de los mismos en el ret\u00edculo endopl\u00e1smico es capaz de promover un efecto similar.<\/p>\n DIRECCIONAMIENTO DE ANT\u00cdGENOS AL RET\u00cdCULO ENDOPL\u00c1SMICO A TRAV\u00c9S DE LA EXOTOXINA A DE LA EXOTOXINA A DE PSEUDOMONAS<\/strong><\/p>\n Otra estrategia para direccionar ant\u00edgenos al ret\u00edculo endopl\u00e1smico consiste en utilizar las caracter\u00edsticas propias de la exotoxina A de Pseudomonas aeruginosa. Dicha toxina por s\u00ed sola es capaz de translocarse desde el espacio extracelular hacia el ret\u00edculo endopl\u00e1smico y afectar la s\u00edntesis de prote\u00ednas debido a su acci\u00f3n de ADP-ribosilasa, convirti\u00e9ndose as\u00ed en una herramienta para estudios de citotoxicidad antitumoral y en una estrategia para el direccionamiento de ant\u00edgenos al RE. (51)<\/p>\n Inicialmente se evalu\u00f3 la fusi\u00f3n de E7 a la exotoxina A (la cual carec\u00eda del dominio catal\u00edtico, PE(\u2206III)) en vacunas de ADN, generando una respuesta CD8+ espec\u00edfica, as\u00ed como la capacidad de erradicar tumores establecidos. (52) Posteriormente, al evaluar una fusi\u00f3n similar en un sistema de vacunas proteicas, se determin\u00f3 que el dominio II era insuficiente para despertar una respuesta inmune espec\u00edfica, pero que al a\u00f1adir la se\u00f1al de KDEL en el extremo C-terminal se lograba obtener dicha respuesta. (53) Los autores de este trabajo mencionan que la se\u00f1al KDEL podr\u00eda aumentar la estad\u00eda del ant\u00edgeno en el RE, lo que podr\u00eda traducirse en un mejor procesamiento y presentaci\u00f3n del ant\u00edgeno. Asimismo, en otros trabajos se han evaluado otras construcciones, en las que se ha concluido que es necesaria la coadministraci\u00f3n de las fusiones PE(\u2206III)\/E6 y PE(\u2206III)\/E7 para obtener un efecto protector total; (54) as\u00ed como el uso de las prote\u00ednas PE(\u2206III) y KDEL fusionadas a E6 y E7 en combinaci\u00f3n de agentes quimioterap\u00e9uticos, (55) donde adem\u00e1s se demostr\u00f3 que versiones de E6 y E7 no oncog\u00e9nicas presentan una mayor inmunogenicidad que sus formas nativas.<\/p>\n ENV\u00cdO Y RETENCI\u00d3N DE ANT\u00cdGENOS EN RET\u00cdCULO ENDOPL\u00c1SMICO<\/strong><\/p>\n En nuestro equipo de investigaci\u00f3n se ha trabajado con la estrategia de fusionar ant\u00edgenos a las se\u00f1ales de env\u00edo y retenci\u00f3n en ret\u00edculo endopl\u00e1smico. En un primer trabajo se evalu\u00f3 la fusi\u00f3n del ant\u00edgeno E7 al p\u00e9ptido se\u00f1al y la se\u00f1al KDEL de la calreticulina (SP-E7-KDEL); esta construcci\u00f3n se prob\u00f3 mediante terapia g\u00e9nica adenoviral en un modelo murino de c\u00e1ncer in situ, obteniendo un potente efecto antitumoral y la liberaci\u00f3n de IFN-\u03b3 de manera espec\u00edfica de ant\u00edgeno; (56) esto concuerda con experimentos posteriores en los que hemos probado esta misma estrategia con vacunas de ADN que expresan versiones mutantes de los ant\u00edgenos E6 y E7 sin capacidad oncog\u00e9nica, las cuales son administradas por biobal\u00edstica en un modelo murino terap\u00e9utico de c\u00e1ncer in situ o metast\u00e1sico con resultados muy prometedores (art\u00edculo pendiente de publicaci\u00f3n). Actualmente nos encontramos evaluando el grado de participaci\u00f3n de cada una de las se\u00f1ales en el efecto antitumoral observado, as\u00ed como el posible mecanismo de procesamiento de los ant\u00edgenos para la activaci\u00f3n del sistema inmune.<\/p>\n Por todo lo anterior, creemos que la fusi\u00f3n del p\u00e9ptido se\u00f1al de la calreticulina en el extremo N-terminal y la se\u00f1al KDEL al extremo C-terminal de un ant\u00edgeno puede ser una estrategia segura y eficaz para despertar una respuesta inmune antitumoral. Esta estrategia podr\u00eda ser utilizada con otros ant\u00edgenos en los que sea necesario despertar una respuesta inmune de tipo celular. Sin embargo, se necesitar\u00e1n m\u00e1s estudios para esclarecer a detalle su mecanismo de acci\u00f3n, as\u00ed como su efectividad en otros modelos.<\/p>\n CONSIDERACIONES FINALES<\/strong><\/p>\n Hemos recapitulado diversas estrategias de inmunizaci\u00f3n con ant\u00edgenos del VPH fusionados a chaperonas, o fragmentos de ellas, con el fin de enviarlos (y aumentar su\u00a0estad\u00eda) al ret\u00edculo endopl\u00e1smico, las cuales han demostrado ser eficaces en la mejora de la respuesta inmune obtenida; sin embargo, los mecanismos involucrados a\u00fan son desconocidos. A pesar de enfocarnos en el c\u00e1ncer cervical, el uso de estas estrategias no est\u00e1 restringido a este padecimiento, por lo que pueden ser aplicadas en otros tipos de tumores, as\u00ed como con distintos sistemas adyuvantes, mejorando as\u00ed las perspectivas terap\u00e9uticas.<\/p>\n Algunos de los eventos que suponemos podr\u00edan estar involucrados se basan en la sobreexpresi\u00f3n de los ant\u00edgenos en ret\u00edculo endopl\u00e1smico y posiblemente la activaci\u00f3n de una respuesta de estr\u00e9s en ret\u00edculo endopl\u00e1smico. (57) En aquellas c\u00e9lulas en las cuales la inmunizaci\u00f3n promueva una expresi\u00f3n prolongada (debido al vector de expresi\u00f3n) se podr\u00eda activar la apoptosis, y posteriormente la fagocitosis por APC de los fragmentos celulares cargados con ant\u00edgenos solos o fusionados a chaperonas, generando as\u00ed un proceso de presentaci\u00f3n cruzada que podr\u00eda aumentar la respuesta inmune. Mientras que aquellas c\u00e9lulas que solamente generen una respuesta de estr\u00e9s en ret\u00edculo endopl\u00e1smico de manera aguda, podr\u00eda procesarse el ant\u00edgeno mediante la v\u00eda ERAD, y esto generar\u00eda p\u00e9ptidos que podr\u00edan reingresar a ret\u00edculo endopl\u00e1smico para ser presentados por el MHC-I. Sin embargo, ambos procesos pueden estar involucrados en mejorar la respuesta inmune espec\u00edfica para el ant\u00edgeno en cuesti\u00f3n.<\/p>\n A pesar de que estas estrategias han demostrado ser efectivas, hay algunos factores (mencionados a lo largo de la revisi\u00f3n) que deben analizarse durante el dise\u00f1o de los candidatos a vacunas basados en estas estrategias para garantizar la funcionalidad y seguridad de los mismos; asimismo, es importante resolver algunas inc\u00f3gnitas (tabla I) acerca del procesamiento de ant\u00edgenos para la presentaci\u00f3n de ep\u00edtopos y c\u00f3mo utilizar este conocimiento para la obtenci\u00f3n de vacunas terap\u00e9uticas contra esta y otras enfermedades.<\/p>\n <\/p>\n * Universidad Aut\u00f3noma de Nuevo Le\u00f3n.<\/p>\n ** Instituto Mexicano del Seguro Social.<\/p>\n Contacto: maricgu_loera@yahoo.com.mx<\/p>\n <\/p>\n REFERENCIAS<\/strong><\/p>\n 1. World Health Organization. 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